目的 心房颤动（简称房颤）常见而高危，其发病机制未完全阐明。心房力学环境改变常见于易发房颤的多种基础疾病，其中压应力是心房应力的重要构成。建立心房肌细胞压应力超负荷模型，为研究心房机械-电反馈过程和房颤力学机制奠定方法学基础。方法 选择出生0～3 d的SPF级SD大鼠乳鼠30只，体质量5～10 g，雌雄不限。设计压应力刺激装置；提取、消化、分离、纯化SD大鼠乳鼠心房肌细胞并体外培养；在培养环境中通过375 r/min（低压应力组，n=4）和735 r/min（高压应力组，n=4）的恒速离心对心房肌细胞施加不同强度的持续压应力刺激48 h，对照组细胞不施加压应力刺激（n=4）；通过细胞骨架染色计算细胞面积，3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-5-（3-羧甲酯基）-2-（4-磺苯基）-2H-四唑（金翁）（内盐）（MTS）法检测细胞活性，分析由压应力超负荷导致的细胞形态和活性变化。结果 成功分离、培养SD大鼠乳鼠心房肌细胞并通过鉴定；接种48 h后细胞贴壁良好，密度70%～80%，呈长梭形、三角形或不规则多边形，可见细胞搏动，心肌细胞纯度达90%～95%。设计的压应力装置在确保湿度、氧和二氧化碳浓度的培养箱环境中对细胞施加压应力刺激。MTS法检测到低压应力组细胞活性高于对照组和高压应力组（OD值0.57±0.03 vs 0.50±0.02、0.50±0.01。P (0.05）。高压应力组细胞活性与对照组差异无统计学意义（OD值0.50±0.01 vs 0.50±0.02。P=0.69）。细胞骨架染色以对照组细胞平均面积为基准，对照组、低压应力组、高压应力组细胞的相对面积依次增大（1.00±0.23 vs 1.20±0.16 vs 1.59±0.20。P (0.05）。离心仓与培养箱的温度差随离心过程逐渐升高，并于6 h后趋于恒定，与培养箱最高温差≤2℃，通过实时调控培养箱温度，可稳定维持离心仓温度于37.0℃～37.5℃。结论 实验构建的离体心房肌细胞压应力超负荷模型具有良好的安全性、实验效率和可重复性，通过离心向培养环境中的离体心房肌细胞施加定量、定时压应力刺激后，心房肌细胞可存活，细胞形态和活性随压应力强度变化。该模型可为进一步探索压应力相关的心房机械-电反馈机制提供方法学基础。