摘要:
目的:建立人胎盘滋养层细胞(以下简称"滋养层细胞")转运模型,应用该模型考察氟西汀(fluoxetine,FXT)暴露下外排转运蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的功能变化,探讨FXT对胎盘转运能力的影响。方法:从足月胎盘中分离、消化、培养得到合胞体滋养层细胞,并从形态学和免疫组织化学等方面对细胞进行鉴定,应用P-gp蛋白的特异性底物罗丹明123及抑制剂维拉帕米对其功能进行评估,确定最适底物浓度及抑制剂浓度,随后采用低、中、高浓度的FXT分别干预滋养层细胞0.5 h、48 h和72 h,应用特异性底物开展细胞摄取实验,考查FXT对P-gp功能、蛋白表达、转录水平的影响。结果:基于人胎盘滋养层摄取转运模型,P-gp底物罗丹明123的最适浓度为1μmol/L,抑制剂维拉帕米的最适浓度为10μmol/L;低、中、高浓度FXT分别干预滋养层细胞0.5 h、48 h和72 h后,P-gp的底物罗丹明123在细胞内蓄积水平升高(P(0.05)。FXT可显著性下调P-gp蛋白表达(P(0.05),但对P-gp mRNA水平无显著影响(P)0.05)。结论:FXT可能通过下调P-gp的蛋白表达而抑制其外排转运功能。