目的 探索叶酸预防神经管畸形的机制及其与Wnt/β-catenin信号通路和氧化应激之间的相关性。方法 将C57BL/6小鼠30只按照雌雄=2∶1合笼过夜，次日清晨检出阴栓的雌鼠视为怀孕0.5 d。孕鼠随机分成对照组（Control）、模型组（Model）、叶酸低剂量组（FA-L）和叶酸高剂量组（FA-H），每组5只。FA-L组（2.0μg/mL）、FA-H组（10.0μg/mL）、NTDs模型组和正常组（生理盐水）按25μL/（g·d）体积灌胃。孕7.5 d时一次性腹腔注射12.5 mg/kg的5-氟尿嘧啶建立NTDs模型（对照组注射等体积生理盐水）。孕12.5 d孕鼠眼眶后静脉丛采血，断颈处死，体视显微镜下观察胎鼠畸形及神经管发育情况。检测胎鼠脑组织中GSH含量，SOD和GSH-Px活力，Wnt1、Frizzled-4、Gsk-3β、β-catenin mRNA相对表达量及孕鼠血清Hcy含量。结果 与对照组比较，5-FU诱导的NTDs模型组胎鼠脑组织GSH含量、SOD和GSH-Px活力及Gsk-3β mRNA相对表达量均显著降低（P＜0.05），同时Wnt1、Frizzled-4、β-catenin mRNA相对表达量及孕鼠血清Hcy含量显著增高（P＜0.05），而在5-FU诱导同时增补不同剂量叶酸的FA-L组和FA-H组中，上述指标变化得到不同程度缓解。结论 增补叶酸可能通过抑制氧化应激和降低Hcy水平调控Wnt/β-catenin信号通路，对5-FU诱导的胚胎NTDs有预防作用。