摘要：
目的:探讨土荆皮乙酸(Pseudolaric acid B,PAB)诱导宫颈癌Siha细胞发生凋亡和铁死亡的机制.方法:CCK8法检测PAB对宫颈癌Siha细胞的细胞毒性.Annexin V-FITC和PI双荧光染色检测细胞凋亡.PI和Hochest染色,荧光显微镜观察细胞核形态和细胞死亡情况.流式细胞仪检测细胞周期及细胞内活性氧(ROS)水平.脂质过氧化传感器BODIPYTM 581/591 C11染色,荧光显微镜检测细胞内脂质过氧化.JC-1染色,荧光显微镜观察细胞内线粒体膜电位变化.Western blot检测铁死亡相关蛋白GPX4、SLC7A11、Ferritin、HMOX1 和凋亡相关蛋白 PARP、c-IAP1、c-IAP2、XIAP、Survivin 的表达.RT-PCR 检测铁死亡相关基因的mRNA表达水平.结果:PAB能够显著抑制宫颈癌Siha细胞的增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期.其次,PAB促进细胞内ROS水平升高,脂质过氧化物积累,和线粒体膜电位上升.同时,上调HMOX1蛋白和mRNA的表达,下调GPX4、SLC7A11蛋白和mRNA表达,下调Ferritin、c-IAP1、c-IAP2、XIAP、Survivin的蛋白表达.结论:PAB可以显著促进宫颈癌Siha细胞的细胞死亡,作用机制可能与上调HMOX1诱导宫颈癌细胞凋亡和铁死亡有关.
