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文章类型：
机构：
[1]昆明医学院第一附属医院器官移植中心云南省昆明市650032
外科科室
器官移植中心
昆明医科大学附属第一医院
出处：
ISSN：
关键词：
Kupffer细胞
细胞分离
原代培养
摘要：
目的:探讨一种简便、高效的大鼠离体肝脏分离Kupffer细胞(KCs)及原代培养的方法.方法:采用大鼠肝脏离体Ⅳ型胶原酶灌注,剪碎肝脏,37℃消化30 min,低速离心去除肝细胞,Pcrcoll不连续密度梯度离心和选择性贴壁的方法分离KCs.通过墨汁吞噬实验和ED2免疫细胞化学来鉴定KCs.结果:分离的KCs的得率在细胞贴壁前(2.1±0.3)×106/g肝脏、贴壁后(1.5±0.1)×106/g肝脏,用0.4%台盼蓝染色,活率大于92%,ED2染色阳性的细胞达90%以上,分离的细胞培养后功能完整并延伸呈不规则型.结论:本实验建立的大鼠肝脏KCs的分离培养方法简便、高效、稳定,培养的细胞具有良好的生物学性状,为进一步研究提供基础.
基金：
云南省自然科学基金(2007C137M);云南省科技厅联合基金(2007C0009R)
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医学院第一附属医院器官移植中心云南省昆明市650032
[*1]650032,云南省昆明市西昌路295号,昆明医学院第一附属医院器宫移植中心.
通讯作者：
通讯机构：
[1]昆明医学院第一附属医院器官移植中心云南省昆明市650032
[*1]650032,云南省昆明市西昌路295号,昆明医学院第一附属医院器宫移植中心.
推荐引用方式(GB/T 7714)：
曾仲,黄汉飞,宋飞,等.体外灌注法分离大鼠肝脏Kupffer细胞及原代培养[J].世界华人消化杂志.2009,17(25):2550-2554.
