摘要:
目的 建立高效液相色谱测定体外培养肝细胞安定代谢能力的方法,通过测定肝细胞培养液中安定的浓度变化,准确反映肝细胞药物代谢功能.方法 0.5ml体外肝细胞培养上清,销酸铅沉淀除去杂质,以舒乐安定为内标,用氢氧化钠调节碱性,乙醚提取后氮气吹干,甲醇溶解进样,以甲醇:水(60:40)为流动相,流速1.0 ml/min)在紫外检测波长276 nm,柱温30℃下检测分析.结果 安定与内标分离良好,保留时间分别为9.34和4.65 min,达峰处无杂峰干扰.标准曲线范围8.2~81.6 mg/L,线性良好(r=0.999 7,n=6),批间误差0.45%~9.86%(n=5),批内误差0.2%~3.27%(n=5),最低检测浓度为8.2 mg/L.样品在检测过程中保持稳定.结论 本方法取样量少,专一性强,准确度高,线性范围较广,抗干扰能力强,可满足测定体外培养肝细胞的安定代谢能力研究要求.