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PCR-RFLP法检测葡萄糖激酶基因启动子-30位点变异的实验条件研究

The Study of Test Condition with PCR- RFLP Method to Detect the Variant- 30 Position of the Glucokinase Gene Promoter

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资源类型:
机构: [1]昆明医学院第一附属医院检验科 昆明 650032
出处:
ISSN:

关键词: 聚合酶链反应 葡萄糖激酶基因 RFLP 实验条件

摘要:
目的:确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw21I内切酶切割-30位点的最佳实验条件.方法:对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究.结果:最佳引物浓度为0.3μmol/L;以1 U酶量效果最满意;最适DNTP浓度为167μmol/L;最适镁离子浓度为1.5mmol/L 20μL的酶切体系中,最佳酶切产物为5μL,最佳内切酶量为5 U,酶切时间应超过9 h.以上参数偏离最适条件将会导致实验失败.

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第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医学院第一附属医院检验科 昆明 650032
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