摘要:
目的:检测大肠癌及正常组织和细胞株中Weel及其磷酸化形式的表达并探讨Weel对大肠癌细胞株HCT116增殖的调控方式.方法:首先,使用免疫组织化学的方法检测Weel总蛋白及p-Weel(ser53)和p-Wee1(ser642)的表达.其次,使用血清饥饿法大致停滞细胞周期后,用Western blot法测定Wee1及p-Wee1(ser53)和p-Weel(ser642)在HCT116细胞株中的表达.最后,将Weel抑制剂PD 407824稀释成不同浓度,用CCK8法测定不同时间点HCT116的增殖情况及用显微镜观察其形态变化.结果:Wee1、p-Weel(ser53)及p-Wee1(ser642)蛋白在大肠癌组织中的阳性表达率(68.00%、85.00%和91.00%)高于正常组织(9.62%、21.15%和42.31%),有统计学意义(P(0.05,P(0.01).细胞增殖过程中,检测到Weel及其磷酸化蛋白的表达主要在6、12、24 h升高.Weel抑制剂PD 407824可以抑制HCT116细胞增殖(P(0.01).结论:Weel及其磷酸化蛋白的水平与大肠肿瘤的增殖有关,Weel抑制剂有望作为一个新的选择性的肿瘤治疗手段.