摘要：
目的: 通过慢病毒-热休克转录因子2-RNA干
扰(lentivirus-heat shock transcription factor
2-RNA interference, LV-HSF2-RNAi)人巨
噬细胞系(THP-1), 探讨HSF2对THP-1细
胞NOD样受体3(NOD-like receptor family,
pyrin domain containing 3, NLRP3)炎症复
合体及其下游白介素-1β(interleukin-1β, IL-
1β)的影响.
方法: 选用THP-1作为研究对象, 使用慢
病毒(LV-HSF2-RNAi)转染THP-1, 干扰其
HSF2表达, 使用佛波酯(phorbol 12-myristate
13-acetate, PMA)诱导THP-1细胞分化为巨
噬细胞; 将细胞分为对照组与转染组, 使用
脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)刺激细胞;
凝胶电泳PCR检测细胞NLRP3、凋亡相关
斑点样蛋白(apoptosis associated speck- like
protein containing a CADR domain, ASC)、半
胱氨酸蛋白酶-1(cysteine-requiring aspartate
protease-1, Caspase1)、IL-1β mRNA表达; 蛋
白质免疫印迹实验(Western blot)检测细胞
NLRP3、ASC、Caspase1、IL-1β蛋白表达;
酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞培养基
内IL-1β水平.
结果: Western blot检测HSF2干扰组中HSF2
蛋白表达明显低于未转染组和阴性对照组
(P <0.05); PMA诱导THP-1细胞分化, LPS刺
激后, 干扰组NLRP3、ASC、Caspase1、IL-
1β mRNA及蛋白表达水平明显高于对照组
及干扰对照组(P <0.05); HSF2干扰组IL-1β
表达水平明显高于未转染组及阴性对照组
(538.800 pg/mL±52.250 pg/mL vs 257.010
pg/mL±26.148 pg/mL, 238.231 pg/mL±
29.245 pg/mL, P <0.05).
结论: 干扰HSF2可以明显提高THP-1细胞
NLRP3炎症复合体活化水平, 提高IL-1β
水平.
