摘要:
目的建立测定人胎盘灌流液中氟西汀、去甲氟西汀、舍曲林浓度的方法并测定胎盘透过率。方法以格列本脲为内标,采用蛋白沉淀法对样品进行前处理,采用超快速液相色谱-串联质谱(UFLC-MS/MS)法检测。以SynergiTMHydro-RP 80A LC为色谱柱,以水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸)为流动相进行梯度洗脱,流速为0.70 mL/min,柱温为40℃,进样量为5μL。采用电喷雾离子源,以多反应监测模式进行正离子扫描,用于定量分析的离子对分别为m/z 309.9→148.1(氟西汀)、m/z 296.0→134.4(去甲氟西汀)、m/z 306.1→159.0(舍曲林)、m/z 493.9→369.1(内标)。建立单个胎盘小叶双向循环灌注模型,在母体侧胎盘灌流液中加入氟西汀(160 ng/mL)、去甲氟西汀(160 ng/mL)、舍曲林(100 ng/mL)和安替比林(阳性对照,100 ng/mL),采用上述UFLC-MS/MS法于循环0、10、20、30、45、60、90、120、150、180 min时分别测定氟西汀、去甲氟西汀、舍曲林的浓度并计算胎盘透过率。结果氟西汀、去甲氟西汀、舍曲林检测质量浓度的线性范围均为5.00~500 ng/mL(r均大于0.990),定量下限均为5.00 ng/mL;日内、日间RSD均不高于14.0%,相对误差为-9.6%~14.7%;稳定性试验的相对误差为-4.0%~11.0%;残留效应、提取方法、基质效应均不影响待测成分的定量分析。成功建立人胎盘体外循环灌注模型31个,其中15个为氟西汀、去甲氟西汀灌流,10个为舍曲林灌流,6个为安替比林灌流。灌流3 h后,氟西汀、去甲氟西汀、舍曲林的平均胎盘透过率分别为(8.74±1.67)%、(10.70±4.81)%、(5.90%±1.25)%。结论所建UFLC-MS/MS法操作简便、灵敏度和准确度均较高,可用于测定人胎盘灌流液中氟西汀、去甲氟西汀及舍曲林的浓度。氟西汀、去甲氟西汀、舍曲林均可透过胎盘,但舍曲林的胎盘透过率更低。