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gata-3小干扰rna载体对变应性鼻炎小鼠外周血单个核细胞中辅助性t细胞亚群功能的体内调节机制

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ CSCD-E

机构: [1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科 [2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科 [3]昆明医科大学基础医学院,生物化学与分子生物学教研室
出处:

关键词: 鼻炎 过敏 RNA干扰 模型 动物 小鼠 GATA-3 T-bet 慢病毒载体

摘要:
目的 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)介导的GATA-3小干扰RNA载体(si-GATA-3)对变应性鼻炎(AR)小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中辅助性T细胞1(T-helper 1,Th1)和Th2功能的调节作用。方法 构建si-GATA-3,用卵清蛋白构建BALB/c AR模型,si-GATA-3组、si-NC组(无目标基因小干扰RNA的空白对照组)分别用si-GATA-3和si-NC腹腔注射干预AR小鼠,AR组和正常对照组用等量的生理盐水干预。干预结束抽取其外周血,分离PBMCs和血浆。分别用荧光定量PCR和Western blot技术检测PBMCs中GATA-3和T-bet mRNA及其相应蛋白的表达量;用ELISA技术检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果 si-GATA-3滴度为5×10~8 TU/ml。成功制备BALB/C小鼠AR模型。si-GATA-3能明显改善AR小鼠的症状。si-GATA-3组PBMCs中GATA-3 mRNA表达明显低于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组明显高于正常对照组(P<0.01)。PBMCs中GATA-3蛋白和血浆中IL-4的表达量与GATA-3 mRNA表达相似。si-GATA-3组PBMCs中T-bet mRNA及其蛋白的相对表达均明显高于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组二者均明显低于对照组(P<0.01)。si-GATA-3组血浆中IFN-γ的表达量高于正常对照组(P<0.05);AR组与si-NC组中IFN-γ的表达量均明显高于正常对照组和si-GATA-3组(P<0.01)。结论 si-GATA-3能有效改善AR小鼠症状,下调AR小鼠PBMCs中Th2细胞中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白和IL-4的表达,同时上调Th1细胞中T-bet mRNA和T-bet蛋白的表达,纠正Th2/Th1的免疫失衡。

基金:
语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科 [2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科
通讯作者:
通讯机构: [1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科 [2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科
推荐引用方式(GB/T 7714):

资源点击量:57189 今日访问量:0 总访问量:1788 更新日期:2025-01-01 建议使用谷歌、火狐浏览器 常见问题

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