资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ CSCD-E
文章类型:
机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科
外科科室
耳鼻咽喉科
耳鼻喉二科(头颈外科)
昆明医科大学附属第一医院
[2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科
深圳医学信息中心
中山大学附属第七医院
[3]昆明医科大学基础医学院,生物化学与分子生物学教研室
出处:
关键词:
鼻炎
过敏
RNA干扰
模型
动物
小鼠
GATA-3
T-bet
慢病毒载体
摘要:
目的 研究RNA干扰(RNA interference,RNAi)介导的GATA-3小干扰RNA载体(si-GATA-3)对变应性鼻炎(AR)小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中辅助性T细胞1(T-helper 1,Th1)和Th2功能的调节作用。方法 构建si-GATA-3,用卵清蛋白构建BALB/c AR模型,si-GATA-3组、si-NC组(无目标基因小干扰RNA的空白对照组)分别用si-GATA-3和si-NC腹腔注射干预AR小鼠,AR组和正常对照组用等量的生理盐水干预。干预结束抽取其外周血,分离PBMCs和血浆。分别用荧光定量PCR和Western blot技术检测PBMCs中GATA-3和T-bet mRNA及其相应蛋白的表达量;用ELISA技术检测血浆中白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的含量。结果 si-GATA-3滴度为5×10~8 TU/ml。成功制备BALB/C小鼠AR模型。si-GATA-3能明显改善AR小鼠的症状。si-GATA-3组PBMCs中GATA-3 mRNA表达明显低于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组明显高于正常对照组(P<0.01)。PBMCs中GATA-3蛋白和血浆中IL-4的表达量与GATA-3 mRNA表达相似。si-GATA-3组PBMCs中T-bet mRNA及其蛋白的相对表达均明显高于AR组和si-NC组(P<0.01),AR组和si-NC组二者均明显低于对照组(P<0.01)。si-GATA-3组血浆中IFN-γ的表达量高于正常对照组(P<0.05);AR组与si-NC组中IFN-γ的表达量均明显高于正常对照组和si-GATA-3组(P<0.01)。结论 si-GATA-3能有效改善AR小鼠症状,下调AR小鼠PBMCs中Th2细胞中GATA-3 mRNA、GATA-3蛋白和IL-4的表达,同时上调Th1细胞中T-bet mRNA和T-bet蛋白的表达,纠正Th2/Th1的免疫失衡。
基金:
国家自然科学基金(81960185);云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金[2018FE001(-205)]
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科
[2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科
通讯作者:
通讯机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院耳鼻咽喉头颈外科
[2]中山大学附属第七医院(深圳)耳鼻咽喉科
推荐引用方式(GB/T 7714):
李玉晓,贺铭,王天蓉,等.gata-3小干扰rna载体对变应性鼻炎小鼠外周血单个核细胞中辅助性t细胞亚群功能的体内调节机制[J].中国耳鼻咽喉头颈外科.2023,30(10):646-651.