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文章类型：
机构：
[1]650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科
外科科室
泌尿外科
昆明医科大学附属第一医院
出处：
ISSN：
关键词：
PC-3细胞
维生素D受体(VDR)
GLi1蛋白
基因干扰
摘要：
目的 初步探讨慢病毒携带shRNA-VDR载体干扰前列腺癌PC-3细胞中VDR基因对GLi1的影响.方法 依照PC-3细胞的培养条件培养细胞;采用荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法检测PC-3细胞中VDR、GLi1两个基因表达情况;对PC-3细胞病毒侵染进行效率评价;运用RT-PCR法检测PC-3细胞VDR基因干扰效果及Gli1转录水平改变情况.结果 细胞培养:拍照记录细胞状态:PC-3细胞生长状态良好,以4 d为1周期进行传代;荧光定量PCR法和免疫细胞化学SP法显示VDR、GLi1均在PC-3细胞中表达;慢病毒侵染效率显示为按照1:10的比例向PC-3细胞加入LV3-NC慢病毒时,细胞侵染效率最好,约为95%左右;RT-PCR显示:VDR-shRNA慢病毒成功干扰VDR表达,在VDR-shRNA慢病毒转染72 h后与对照组相比实验组VDR基因转录水平下降85%(P<0.05),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升9%(P<0.05);而当转染96 h后实验组VDR基因转录水平与对照组相比下降99%(沉默),同时实验组GLi1基因转录水平与对照组相比上升248%(P<0.05).结论 所培养的PC-3细胞状态较好;VDR和GLi1基因在PC-3细胞中均表达;慢病毒按照1:10的比例侵染PC-3效率最高;当VDR被干扰后GLi1表达增高,因而在前列腺癌细胞中维生素D可抑制Hh信号通路可致GLi1表达下调.
基金：
云南省应用基础研究(昆医联合专项基金)(2017FE467-042,2014FB013)
第一作者：
第一作者机构：
[1]650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科
通讯作者：
通讯机构：
[1]650032,昆明医科大学第一附属医院泌尿外科
推荐引用方式(GB/T 7714)：
张远东,赵晖,申吉泓,等.VDR和GLi1在前列腺癌细胞PC-3中的表达及其相关性[J].实用医学杂志.2017,33(21):3530-3534.
