资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
文章类型:
机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院神经内科,昆明650031
内科科室
神经内科
昆明医科大学附属第一医院
[2]昆明医科大学第一附属医院检验科,昆明650031
昆明医科大学附属第一医院
[3]昆明医科大学生物医学工程研究中心,昆明650500
出处:
ISSN:
关键词:
CNN3
基因
沉默
重组
慢病毒载体
摘要:
目的:建立可调控大鼠局部脑区CNN3基因表达的技术,为进一步研究CNN3基因参与脑内病理生理过程奠定基础。方法设计并合成针对CNN3基因的全长编码序列cDNA和3条shRNA干扰靶点序列,利用基因工程技术构建CNN3-OE和3个CNN3-shRNA慢病毒载体,在立体定位仪引导下注入大鼠海马,采用蛋白免疫印迹技术筛选CNN3基因的最佳沉默序列,并找出重组表达和沉默慢病毒载体调控海马CNN3基因的变化规律。结果 CNN3-OE和3个CNN3-shRNA慢病毒干扰载体均构建成功,转染后8周内对海马CNN3基因水平均有一定调控作用,其中CNN3-shRNA2载体组在转染后的8周内海马CNN3基因编码蛋白calponin-3水平均显著性下调,最高抑制率为73.26%;CNN3-OE慢病毒载体组中海马calponin-3蛋白水平具有统计学意义的升高仅在转染后第14天,上调率为93.88%。结论通过定位注射CNN3-OE和CNN3-shRNA慢病毒载体可在体调控局部脑区CNN3基因表达,为后续的机制研究和开拓疾病防治新途径奠定基础。
基金:
国家自然科学基金地区基金(81260199)%云南省科技厅-昆明医科大学联合基金(2012FB030)%云南省卫生科技计划项目(2012WS0002)。
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明医科大学第一附属医院神经内科,昆明650031
通讯作者:
推荐引用方式(GB/T 7714):
孙俊梅,龙晶晶,韩雁冰,等.靶向调控大鼠海马 CNN3基因表达载体的构建及鉴定[J].中国比较医学杂志.2016,26(02):55-61.