资源类型：
收录情况：
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-C
文章类型：
机构：
[1]中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室,云南昆明650223
[2]昆明医学院生物化学教研室,云南昆明650500
[3]中国科学院研究生院,北京100049
[4]昆明医学院第一附属医院妇产科,云南昆明650032
外科科室
妇产科
产科
昆明医科大学附属第一医院
出处：
ISSN：
关键词：
Bm-TFF2
突变体
表达
纯化
细胞迁移
摘要：
大蹼铃蟾三叶因子Bm-TFF2具有较人TFF2更强的促细胞迁移和抗凋亡活性.该研究利用RT-PCR方法扩增得到野生型Bm-TFF2的基因,然后分别构建N端、C端和分子中两个精氨酸突变的突变体,最后连接表达载体产生pET32a(+)/Bm-TFF2突变型重组质粒,转入大肠杆菌中,经37℃培养,IPTG诱导,其融合蛋白主要存在于包涵体中,用组氨酸标签的亲合柱纯化溶解后的包涵体上清,进一步用RP-HPLC纯化得到硫氧还蛋白(TRX)/Bm-TFF2突变型融合蛋白.通过SDS-PAGE和Western blotting检测分析其纯度和特异性.最终,从1L培养基中得到20mg纯度为95％的三种重组突变型融合蛋白.三种突变型重组蛋白都具有剂量依赖性的促细胞迁移活性,并且其活性无显著差异.该研究为进一步研究Bm-TFF2结构和功能的关系以及揭示其作用的分子机制奠定了基础.
基金：
中国科学院"西部之光"(Y102291081);"973"项目(2010CB529800);国家基金委面上项目(30870304)
基金编号：
Y102291081
中科院(CAS)分区：
最新[2023]版：
大类
|
1 区
生物学
小类
|
1 区
动物学
第一作者：
第一作者机构：
[1]中国科学院昆明动物研究所 动物模型与人类疾病机理重点实验室,云南昆明650223
[2]昆明医学院生物化学教研室,云南昆明650500
共同第一作者：
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
余果宇,向阳,张红芸,等.三叶因子Bm-TFF2突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性[J].动物学研究.2011,32(04):379-385.
