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◇ 中华系列
文章类型：
机构：
[1]昆明医学院第一附属医院神经外科 650032
外科科室
神经外科
昆明医科大学附属第一医院
[2]中日友好医院神经外科
[3]华中科技大学同济医学院附属协和跃院神经外科
[4]中日友好医院临床医学研究所
出处：
ISSN：
关键词：
胶质细胞源性神经营养因子
真核表达
重组质粒
转染
摘要：
目的 构建人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因真核表达载体并观察其在COS-7细胞内的表达.方法 应用RT-PCR从U251细胞总RNA中扩增GDNF cDNA,将其克隆至真核表达载体pEGFPN1,经酶切鉴定及序列分析后,以Fugene HD介导转染COS-7细胞,应用免疫细胞化学和Western blot鉴定其在细胞内的表达.结果 RT-PCR产物为650bp的特异片段,重组质粒pEGFPN1-GDNF经双酶切产生650bp和4.7kb的片段,测序分析结果与文献报道结果完全一致.将其转染COS-7细胞后,免疫细胞化学、Western blot结果表明GDNF蛋白能在COS-7细胞中正确表达.结论 成功构建了pEGFPN1-GDNF真核表达载体,为进一步开展帕金森病的基因治疗研究奠定了基础.
第一作者：
第一作者机构：
[1]昆明医学院第一附属医院神经外科 650032
通讯作者：
推荐引用方式(GB/T 7714)：
邓兴力,刘如恩,杨智勇,等.pEGFPN1-GDNF真核表达载体的构建及其表达[J].中华神经外科杂志.2008,24(8):628-631.
