摘要：
目的:进一步分离人肺癌组织特异表达基因和肺癌特异相关基因,构建人肺鳞癌YTMLC90细胞cDNA文库.方法:从培养的人肺鳞癌YTMLC90细胞株中提取总RNA,利用经修饰的oligo(dT)引物(含sfi IB酶切位点)合成cDNA第一链,同时根据真核生物nRNA 5'端帽子结构特点,利用SMART核苷酸(含Sfi IA酶切位点)作为cDNA第一链在mRNA 5'端延伸出去的模板,进而以此序列为引物利用LD-PCR(long-distance PCR)合成双链cDNA,双链cDNA经Sfi I(IA和IB)酶切和过柱分级分离后,克隆入经Sfi I酶切的载体后经体外包装而成cDNA文库.
