摘要：
目的 探讨β-羟基丁酸(BHB)对SD大鼠神经元细胞缺氧损伤的保护作用及其机制.方法 原代培养SD大鼠神经元细胞,不同浓度(2 mM、5 mM、10 mM、20 mM和50 mM)BHB预处理24 h,三气培养箱糖氧剥夺培养2h,线粒体超氧化物探针检测细胞线粒体氧化应激状态,CCK8检测细胞活力变化,QPCR测Na+偶联单羧酸转运体1(SMCT1)、caspae3和Cytochrome C的mRNA表达,Western Blot测SMCT1、caspase3、细胞色素C(Cytochrome C)、ERK1/2和p-ERK1/2(T202/204)蛋白表达.结果 2 mM、5 mM和10 mM浓度BHB对神经元细胞活力无显著影响(P＞0.05),20 mM和50mM浓度BHB可致神经元活力显著降低(P＜0.05).神经元缺氧培养后,活力降低(P＜0.05),线粒体氧化应激反应增强(P＜0.05),SMCT1的mRNA水平和蛋白水平显著降低(P＜0.05),caspase3与Cytochrome C的mRNA水平和蛋白水平明显增强(P＜0.05),ERK1/2的蛋白磷酸化水平降低(P＜0.05).BHB预处理缺氧神经元,低浓度对细胞无明显影响(P＞0.05);浓度增至10 mM,相比单纯缺氧组,神经元活力显著改善(P＜0.05),线粒体氧化应激状态降低(P＜0.05),SMCT1的mRNA水平和蛋白水平显著增加(P＜0.05),caspase3与Cytochrome C的mRNA水平和蛋白水平明显降低(P＜0.05),ERK1/2的蛋白磷酸化水平升高(P＜0.05).结论 高浓度(＞20 mM)BHB对神经元细胞有毒性作用;低浓度(＜5 mM) BHB对糖氧剥夺的神经元细胞无明显作用;10 mM浓度的BHB预处理可增加SMCT1转运体的表达,通过启动ERK1/2信号通路,降低神经元线粒体的氧化应激,减少凋亡,从而对糖氧剥夺的原代神经元细胞发挥保护作用.
