资源类型:
收录情况:
◇ 统计源期刊
◇ 北大核心
◇ CSCD-E
文章类型:
机构:
[1]昆明医学院基础医学院计算机教研室云南昆明650031
[2]昆明医学院第一附属医院心内科分子心血管病研究室云南昆明650032
内科科室
心脏内科
昆明医科大学附属第一医院
[3]昆明医学院生物医学工程研究中心云南昆明650031
出处:
ISSN:
关键词:
生物信息学
基冈合成
链霉亲和素
链霉亲和素磁珠
摘要:
目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离.方法:利用NCBI、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因.将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速纯化生物素化的DNA.结果:用化学与酶促相结合一步法合成链霉亲和素全基因序列,用较短寡聚核苷酸链及较低的引物浓度合成该基因突变率很低,链霉亲和素在大肠杆菌中得到高效表达.用硅酸包衣的磁性微球对磁场反应良好且无磁记忆性,用碳二亚胺可实现活性羧基磁性微球与链霉亲和素两者的交联,反应条件温和.结论:制备的链霉亲和素磁珠复合物可用于生物素化的PCR产物纯化.
基金:
国家自然科学基金项目(30860278);云南省自然科学基金项目(2006C0071M%2007C0001R);云南省教育厅重大专项(ZD2010007)
基金编号:
30860278
第一作者:
第一作者机构:
[1]昆明医学院基础医学院计算机教研室云南昆明650031
通讯作者:
通讯机构:
[2]昆明医学院第一附属医院心内科分子心血管病研究室云南昆明650032
[3]昆明医学院生物医学工程研究中心云南昆明650031
推荐引用方式(GB/T 7714):
谢月辉,余睿,班韶,等.利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因[J].暨南大学学报(自然科学与医学版).2011,32(02):171-175.