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利用生物信息学数据及工具合成表达链霉亲和素基因

Using bioinformatics databases and tools to design and synthesize the streptavidin gene

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资源类型:

收录情况: ◇ 统计源期刊 ◇ 北大核心 ◇ CSCD-E

机构: [1]昆明医学院基础医学院计算机教研室云南昆明650031 [2]昆明医学院第一附属医院心内科分子心血管病研究室云南昆明650032 [3]昆明医学院生物医学工程研究中心云南昆明650031
出处:
ISSN:

关键词: 生物信息学 基冈合成 链霉亲和素 链霉亲和素磁珠

摘要:
目的:人工合成表达链霉亲和素基因,制备链霉亲和素磁珠复合物用于核酸分离.方法:利用NCBI、BCM等提供的生物信息及软件工具,将链霉亲和素蛋白的基因进行密码子优化,并分割成互为重叠的小片段寡聚核苷酸链,采用化学和酶促合成相结合的方法合成编码链霉亲和素蛋白基因.将纯化的链霉亲和素通过偶联剂与带羧基的磁粒共价结合,用于快速纯化生物素化的DNA.结果:用化学与酶促相结合一步法合成链霉亲和素全基因序列,用较短寡聚核苷酸链及较低的引物浓度合成该基因突变率很低,链霉亲和素在大肠杆菌中得到高效表达.用硅酸包衣的磁性微球对磁场反应良好且无磁记忆性,用碳二亚胺可实现活性羧基磁性微球与链霉亲和素两者的交联,反应条件温和.结论:制备的链霉亲和素磁珠复合物可用于生物素化的PCR产物纯化.

基金:
语种:
第一作者:
第一作者机构: [1]昆明医学院基础医学院计算机教研室云南昆明650031
通讯作者:
通讯机构: [2]昆明医学院第一附属医院心内科分子心血管病研究室云南昆明650032 [3]昆明医学院生物医学工程研究中心云南昆明650031
推荐引用方式(GB/T 7714):

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