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人β-神经生长因子基因真核细胞表达载体的构建与鉴定

Construction and Identification of Eukaryotic cell Expression Vector of Human Nerve Growth Factor beta Gene

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资源类型:
机构: [1]四川大学华西医学中心人体解剖教研室 [2]昆明医学院附属一院肿瘤研究中心
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关键词: β-神经生长因子 RT-PCR 克隆 真核表达载体

摘要:
目的构建人β-神经生长因子基因(β-NGF)的真核细胞表达载体,为运用进行基因治疗和细胞移植的研究奠定基础.方法采用RT-PCR方法从人脑肿瘤旁组织的mRNA中扩增人β-神经生长因子的基因片段,将目的基因、真核表达载体pcDNA3同时经HindⅢ和Apa双酶切、纯化、连接、转化及筛选而构建重组载体pcDNA3-β-NGF;经酶切和测序对重组体进行分析和进一步鉴定.结果RT-PCR产物琼脂糖电泳结果显示:在预期位置有阳性条带.重组载体经酶切、测序等分析插人的基因片段为表达β-NGF的基因.结论人β-NGF基因重组真核细胞表达载体pcDNA3-β-NGF构建成功,为进一步开展β-NGF基因治疗脑部疾患、脊髓损伤修复等研究奠定基础.

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第一作者机构: [1]四川大学华西医学中心人体解剖教研室
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